teknova培養(yǎng)基在優(yōu)化過程中的設(shè)計(jì)步驟
2022-06-14 703
培養(yǎng)基是指人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境，供給微生物、植物或動(dòng)物（或組織）生長繁殖的，由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)，是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質(zhì)。
teknova培養(yǎng)基的澄清度應(yīng)以便于輕松的觀察到渾濁為宜、濃度應(yīng)當(dāng)遵循供應(yīng)商建議的濃度、若無菌生產(chǎn)過程中使用了過濾器，能夠通過生產(chǎn)過程同一級(jí)別的過濾器過濾為準(zhǔn)，如需稀釋過濾，培養(yǎng)基濃度應(yīng)提供微生物生長能力驗(yàn)證;同時(shí)培養(yǎng)基料液應(yīng)能滿足全部覆蓋生產(chǎn)設(shè)備。影響該培養(yǎng)基滅菌效果的因素除滅菌溫度和時(shí)間外，還有培養(yǎng)基的成分和物理狀態(tài)、PH、微生物數(shù)量、微生物細(xì)胞含水量、微生物細(xì)胞菌齡和耐熱性、蒸汽中空氣的排除情況、攪拌和泡沫等。
teknova培養(yǎng)基的優(yōu)化過程中，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分為3個(gè)步驟：
1.篩選，基于現(xiàn)有商業(yè)培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，以確定重要組分的群組以及初步優(yōu)化，如使用簡單的、以實(shí)驗(yàn)為依據(jù)的單次單因子方法解決復(fù)雜的優(yōu)化。
2.優(yōu)化，基于DOE對(duì)已確定的重要組分進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化，主要優(yōu)化基礎(chǔ)培養(yǎng)基、補(bǔ)料培養(yǎng)基、一些添加物等，如使用響應(yīng)曲面法找出多變量體系中的*條件。
3.驗(yàn)證，對(duì)最終的培養(yǎng)基進(jìn)行放大驗(yàn)證，分別用優(yōu)化好的培養(yǎng)基與現(xiàn)用的或商業(yè)無血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，比較各自的生長指標(biāo)與抗體表達(dá)水平。
