Transgenomics(IDT) 突變檢測(cè)試劑盒的結(jié)構(gòu)
全部在一個(gè)優(yōu)化的緩沖體系中完成，非常簡(jiǎn)單，去除未突變模板,突變效率高達(dá)90%，不需要連接步驟,反應(yīng)結(jié)束后可以直接轉(zhuǎn)化。提供陽性對(duì)照質(zhì)粒puc19和突變引物，便于分析失敗原因，Transgenomics(IDT) 突變檢測(cè)試劑盒可用于制備點(diǎn)突變,缺失突變和插入突變。在轉(zhuǎn)化時(shí)千萬別把它帶入轉(zhuǎn)化反應(yīng)，否則會(huì)嚴(yán)重影響轉(zhuǎn)化效率。在涂板前通過離心濃縮的辦法，把所有被轉(zhuǎn)化后的細(xì)菌全部涂布到含有適當(dāng)抗生素的平板上培養(yǎng)過夜。通常會(huì)得到50個(gè)以下的克隆，可按常規(guī)方法制備質(zhì)粒并測(cè)序。
實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后若樣品中含有試劑盒疫病毒抗體，則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標(biāo)記物，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加tmb底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)。試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存，實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物a、b液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器，使用干凈的塑料容器配置洗滌液，使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
